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　　儲(chǔ)存條件：2~8℃

　　產(chǎn)品簡(jiǎn)介

　　H9細(xì)胞消化液可以應(yīng)用于非飼養(yǎng)層依賴的H9傳代，該工作液屬于非酶類溫和消化液，對(duì)細(xì)胞損傷小且消化時(shí)間適中便于操作，是一種已被普遍使用的消化液，可與H9培養(yǎng)基搭配使用。

　　操作說(shuō)明

　　1.將H9完全培養(yǎng)基取出并平衡至室溫，取出包被過(guò)Matrix的培養(yǎng)皿/瓶，吸去包被液并加入適量完全培養(yǎng)基，置于5%CO2的37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中。

　　2.吸走待傳代細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中的iPS完全培養(yǎng)基，并且加入無(wú)鈣鎂的PBS溶液洗一次。

　　3.加入0.5mM EDTA傳代工作液使之完全覆蓋皿/瓶底。

　　4.室溫放置5~8 min或37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育3~5 min，顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離皿/瓶底，克隆內(nèi)部大部分細(xì)胞間出現(xiàn)間隙但尚未相互分離，肉眼觀察到細(xì)胞集落變得不透明且發(fā)白，表明細(xì)胞消化時(shí)間理想。

　　5.吸去傳代工作液，即刻加入新鮮的H9完全培養(yǎng)基，用移液器扇形吹打培養(yǎng)皿/瓶底，使皿/瓶底貼附的干細(xì)胞集落脫落，輕柔緩慢吹吸混勻。

　　注：吹吸的力度要輕柔，吹打脫落和吹吸混勻的次數(shù)總共不超過(guò)10次為宜。吹打過(guò)度導(dǎo)致大量單細(xì)胞出現(xiàn)是造成細(xì)胞分化或死亡的重要原因。

　　注：如有少量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落，屬于正?，F(xiàn)象。如有大量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落，需延長(zhǎng)消化時(shí)間。

　　6.顯微鏡下觀察細(xì)胞呈4~20個(gè)細(xì)胞大小的團(tuán)塊，水平十字搖勻。

　　7.將細(xì)胞置于5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

　　8.每天換液直至達(dá)到可以傳代的標(biāo)準(zhǔn)。