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人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1
    人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1
  • 平臺(tái)編號(hào):bio-49376
  • 細(xì)胞信息: CCC-HSF-1
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:細(xì)胞系
  • 服務(wù)費(fèi)用及說(shuō)明書:
    加載中……
  • 訂購(gòu)
  • 注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

  人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1

  產(chǎn)品規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶x1;1.5ml凍存管x2

  細(xì)胞數(shù)量:1x10^6;1x10^6

  保存溫度:37℃;-198℃

  運(yùn)輸方式:常溫保溫運(yùn)輸;干冰運(yùn)輸

  安全等級(jí):1

  用途限制:僅供科研3類

  培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone)

  培養(yǎng)溫度:37℃

  二氧化碳濃度:5%

  簡(jiǎn)介:人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1取材自引產(chǎn)的15周男性胚胎組織,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。

  注釋:To cite this cell line use:CCC-HSF-1(RRID:CVCL_6886)

  STR信息:/

  參考文獻(xiàn):/

  驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

  1、收到人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

  2、收到人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

  3、收到人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右,血清濃度還是在10%。

  4、收到人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

  5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。

  6、24小時(shí)后,人皮膚成纖維細(xì)胞CCC-HSF-1細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之完全脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。

  7、貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

  特別提醒:原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。

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