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    小鼠肺上皮細胞
  • 平臺編號:bio-51553
  • 細胞信息: MLE12細胞/MLE-12
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:/
  • 服務(wù)費用及說明書:
    加載中……
  • 訂購
  • 注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)

細胞介紹
該品系由 Kathryn A. Wikenheiser 于 1992 年在人類表面活性蛋白 C 基因啟動子區(qū)控制下的 SV40 大 T 抗原轉(zhuǎn)基因小鼠中建立。細胞在 6 到 9 個月裸鼠內(nèi)產(chǎn)生腫瘤,肺表面活性蛋白 B、C (SP-B、SP-C),細胞表達大 T 抗原的 mRNA。
檢測到肺表面活性蛋白 B 和 C。細胞分泌磷脂以響應(yīng)佛波酯和 ATP,但不響應(yīng)毛喉素。
細胞特性
1) 來源:小鼠正常肺組織
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106  細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)  用途:僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。     
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基          94%
優(yōu)質(zhì)胎牛血清                                2%
GlutaMAX-1谷氨酰胺                     1%
HEPES 1M Buffer solution               1%
P/S青霉素-鏈霉素                         1%
ITS(胰島素+轉(zhuǎn)鐵蛋白+硒)        1%
氫化可的松                      10nM
雌二醇                           10nM 
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

 

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