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細(xì)胞CELL>
biobw自建細(xì)胞系>
人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞
細(xì)胞名稱:人胚肺二倍體細(xì)胞2BS
產(chǎn)品規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶x1;1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量:1x10^6;1x10^6
保存溫度:37℃;-198℃
運(yùn)輸方式:常溫保溫運(yùn)輸;干冰運(yùn)輸
安全等級(jí):1
用途限制:僅供科研3類
培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:人胚肺二倍體細(xì)胞2BS來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株。
注釋
To cite this cell line use:2BS(RRID:CVCL_BT02)
STR信息
Amelogenin X
CSF1PO 10,12
D3S1358 15
D5S818 11
D7S820 8,11
D8S1179 11,13
D13S317 8,11
D16S539 9,12
D18S51 14,17
D21S11 29,30
FGA 19,22
Penta D 11,13
Penta E 7,11
TH01 7,9
TPOX 8,10
vWA 18
參考文獻(xiàn)
PubMed=8028398;DOI=10.1016/0047-6374(94)90038-8
Tang Z.-Q.,Zhang Z.-Y.,Zheng Y.-S.,Corbley M.J.,Tong T.-J.
Cell aging of human diploid fibroblasts is associated with changes in responsiveness to epidermal growth factor and changes in HER-2 expression.
Mech.Ageing Dev.73:57-67(1994)
PubMed=7564558;DOI=10.1016/0047-6374(94)01557-3
Li J.-H.,Zhang Z.-Y.,Tong T.-J.
The proliferative response and anti-oncogene expression in old 2BS cells after growth factor stimulation.
Mech.Ageing Dev.80:25-34(1995)
PubMed=15265694;DOI=10.1016/j.yexcr.2004.04.044
Guo S.-Z.,Zhang Z.-Y.,Tong T.-J.
Cloning and characterization of cellular senescence-associated genes in human fibroblasts by suppression subtractive hybridization.
Exp.Cell Res.298:465-472(2004)
驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)
1、收到人胚肺二倍體細(xì)胞2BS細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人胚肺二倍體細(xì)胞2BS細(xì)胞,如包裝完好,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理。
3、收到人胚肺二倍體細(xì)胞2BS細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右,血清濃度還是在10%。
4、收到人胚肺二倍體細(xì)胞2BS細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
6、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之完全脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
特別提醒:原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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