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牙鲆細(xì)胞
    牙鲆細(xì)胞
  • 平臺(tái)編號(hào):bio-53736
  • 細(xì)胞信息: FG
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:/
  • 服務(wù)費(fèi)用及說明書:
    加載中……
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  • 注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

細(xì)胞系包裹收到后,請(qǐng)按下列方法操作。 

①培養(yǎng)基:complete growth medium: Minimum essential medium (Eagle) with 2 mM L-glutamine and Earle's BSS adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate, 0.1 mM non-essential amino acids, and 1.0 mM sodium pyruvate, 90%; fetal bovine serum, 10% 如果沒有CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)基中需加入5克/升HEPES。,Temperature: ﹤18.0C,

②。

一.貼壁細(xì)胞

1.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

2.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)50ml培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(此培養(yǎng)基可再用)。

3.加入消化液1~1.5ml,﹤18.0C,消化直到細(xì)胞脫落。

4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,加入步驟2的培養(yǎng)基8ml,再在﹤18.0C,,5%CO2下培養(yǎng)。

二.懸浮細(xì)胞

1.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

2.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)50ml培養(yǎng)基用吸管移到離心管中。(嚴(yán)禁直接傾倒)

3.在1000rpm,10min離心。

4.將上清吸到另一無菌容器中,(此培養(yǎng)基可再用)。

5.對(duì)沉淀用步驟4的培養(yǎng)基再懸浮。

6.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,加入細(xì)胞培養(yǎng)瓶,在﹤18.0C,,5%CO2下培養(yǎng)。

三.半貼壁細(xì)胞

1.參照上述1、2操作。

四.二毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。 

1.此管內(nèi)細(xì)胞濃度在1-5 X 105個(gè),將24孔克隆板的一排6孔每孔內(nèi)加1毫升培養(yǎng)基;

2.將小管無菌開啟,細(xì)胞吸入第1孔內(nèi),倍比稀釋至2孔,再倍比稀釋至3孔,最后至6孔;

3.在﹤18.0C,,5%CO2下培養(yǎng),1周內(nèi)應(yīng)有某孔至細(xì)胞生長至對(duì)數(shù)生長期,取出細(xì)胞至T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,常規(guī)培養(yǎng)。

 

 

 

 

 

 

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