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名稱：小鼠胚胎干細胞 CE-3

種屬：小鼠

組織來源: 胚胎

生長特征: 貼壁細胞

生長形態(tài): 上皮維

培養(yǎng)體系:  90%DMEM(高糖）培養(yǎng)基+10%胎牛血清+1%雙抗

背景描述:  CE3 細胞系衍生自 D3 ES 細胞系

傳代比例:  1:2 1:3

培養(yǎng)條件: 溫度：37℃ 氣象：空氣 95%；CO2：5%

細胞凍存:  90%FBS+10%DSMO；推薦使用無血清凍存液

儲存 -80°；長期保存液氮

倍增時間:  36hours 消化 3-5 分鐘

收到細胞后請第一時間觀察拍照并嚴格按照以下要求進行操作（需遵照無菌操作要求）。

細胞接收處理：

1. 觀察包裝有無漏液、渾濁、破損等情況。有問題請及時拍照反饋銷售人員。

2. 用 75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。細胞在培養(yǎng)瓶中 培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法，因經(jīng)過運 輸貼壁細胞可能會有少許脫落；不用擰開培養(yǎng)瓶蓋.將細胞置于培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時,穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 3-4 小時后，取出細胞培養(yǎng)瓶，觀察、拍照，觀察記錄細胞在運輸過程中是 否有污染情況 4. 貼壁細胞：若細胞生長密度超過 80%.可正常傳代;細胞密度若小于 80%,可 將 細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基吸出，預留 5ml-6ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),細胞密度超過 80% 可再次傳代操作。 懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無菌離心管 內(nèi)，1000rpm 離心 5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打重懸。鏡下觀察時，若細胞密度超過 80%,可將細胞懸液分至 2 個細 胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至 5ml；若細胞密度未超過 80%, 將細胞懸液移至 原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達 80%左右時再進行傳代操作。