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S288C酵母菌基本信息:
名稱:S288C酵母菌
儲(chǔ)存溫度:‐80℃
類別:釀酒酵母
培養(yǎng)方式:28℃,有氧
保存方式:30%甘油,‐80℃
基因型: MATα SUC2 gal2 mal mel flo1 flo8-1 hap1 ho bio1 bio6
參考文獻(xiàn):Mortimer and Johnston (1986) Genetics 113:35-43.
操作說(shuō)明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
2,為保證菌種純正,避免其它細(xì)菌污染,盡量先劃平板,然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
冷凍管開(kāi)封:
用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。
菌株復(fù)溶:
無(wú)菌環(huán)境中旋開(kāi)裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋,吸取1ml左右復(fù)溶液,加入到冷凍管中。輕輕振蕩,使凍干菌株溶解呈懸浮狀。
菌株復(fù)壯:
用無(wú)菌吸管吸取菌懸液,轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識(shí),在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌在30-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48h,真菌在23-28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72h(必要時(shí),可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間)。
菌株傳代:
將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中(盡量增大接種量:如用無(wú)菌吸管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基,邊移動(dòng)邊緩慢釋放),適宜溫度下培養(yǎng),用以菌株的保藏、傳代及制備工作菌株。
注意事項(xiàng):
1、菌種活化前,將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中,長(zhǎng)時(shí)間室溫下放置會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;
2、冷凍管開(kāi)封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行;
3、一些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng);
4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,敬請(qǐng)正確選擇,不清楚時(shí)來(lái)電詢問(wèn);
5、某些厭氧菌的培養(yǎng),自開(kāi)封到接種完成,均需以無(wú)氧氣體充填,以保持厭氧狀態(tài);培養(yǎng)過(guò)程中亦要保持厭氧狀態(tài);
6、某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促進(jìn)生長(zhǎng);
7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動(dòng)、復(fù)溶液渾濁等異常情況,應(yīng)停止使用對(duì)應(yīng)產(chǎn)品。
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