支原體、衣原體培養(yǎng)方法對(duì)比及臨床檢測(cè)建議與采集注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-03-13 09:39:12
支原體和
衣原體是兩類常見(jiàn)的非典型病原體,可引起呼吸道、泌尿生殖道等感染。它們的培養(yǎng)方法與普通細(xì)菌不同,且臨床檢測(cè)中常結(jié)合分子生物學(xué)方法(如PCR)以提高敏感性。以下是關(guān)于兩者細(xì)菌培養(yǎng)的詳細(xì)說(shuō)明:
一、支原體(Mycoplasma)培養(yǎng)
1、生物學(xué)特性
無(wú)細(xì)胞壁,形態(tài)多變,對(duì)培養(yǎng)基要求高。
生長(zhǎng)緩慢(需數(shù)天至數(shù)周),需富含膽固醇和脂肪酸的培養(yǎng)基。
2、培養(yǎng)方法
常用培養(yǎng)基:SP4液體或固體培養(yǎng)基、PPLO培養(yǎng)基(添加馬血清、酵母提取物等)。
培養(yǎng)條件:37℃、5% CO?環(huán)境,需持續(xù)觀察2-3周。
鑒定:通過(guò)培養(yǎng)基顏色變化(如酚紅指示劑)、菌落形態(tài)(“荷包蛋樣”菌落),或PCR確認(rèn)。
3、臨床常見(jiàn)檢測(cè)
呼吸道支原體(如
肺炎支原體):痰液或咽拭子培養(yǎng)(但臨床更多依賴血清學(xué)或PCR)。
1、生物學(xué)特性
專性細(xì)胞內(nèi)寄生,無(wú)法在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。
生活周期包括原體(感染相)和網(wǎng)狀體(復(fù)制相)。
2、培養(yǎng)方法
細(xì)胞培養(yǎng)法:使用McCoy細(xì)胞、HeLa細(xì)胞等,離心促進(jìn)衣原體進(jìn)入細(xì)胞。
步驟:
樣本(如宮頸拭子、尿道拭子)處理后接種于細(xì)胞單層。
37℃孵育48-72小時(shí),后固定染色(吉姆薩染色或熒光抗體染色)觀察包涵體。
鑒定:顯微鏡下見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)包涵體為金標(biāo)準(zhǔn),但操作復(fù)雜且敏感性較低。
三、培養(yǎng)的局限性
敏感性低(尤其
肺炎支原體),易受樣本運(yùn)輸、保存條件影響。
臨床更多依賴分子檢測(cè)(如PCR)或血清學(xué)(IgM抗體)。
耗時(shí)長(zhǎng)(3-7天),需專業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),逐漸被核酸擴(kuò)增技術(shù)(NAAT)取代。
僅用于特定研究或耐藥性分析。
四、臨床檢測(cè)建議
1、優(yōu)先選擇分子檢測(cè)(如PCR、RNA探針):
快速(數(shù)小時(shí))、敏感性高(>90%),適合篩查衣原體/支原體感染。
2、培養(yǎng)的適用場(chǎng)景:
抗生素耐藥性研究。
特殊病例(如治療失敗需活菌藥敏試驗(yàn))。
五、樣本采集注意事項(xiàng)
1、支原體:無(wú)菌拭子采集后立即送檢,或置于專用運(yùn)輸培養(yǎng)基(如STM)。
2、衣原體:需保持細(xì)胞活性,冷藏(2-8℃)并盡快接種至細(xì)胞培養(yǎng)體系。
六、治療提示
1、支原體:對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(阿奇霉素)、四環(huán)素類(多西環(huán)素)敏感。
2、衣原體:首選阿奇霉素或多西環(huán)素,注意性伴侶同治。
若有疑似感染癥狀(如非淋菌性尿道炎、肺炎),建議及時(shí)就醫(yī)并選擇敏感度高的檢測(cè)方法,避免延誤治療。
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